Descripción de la práctica
La biodisponibilidad de los metales es medida mediante la utilizando de agentes quelantes tales como el EDTA o el DTPA en disolución, que tras un periodo de tiempo en contacto con los residuos son capaces de captar todo ión metálico que se encuentre disponible para la planta (Lindsay and Norvell, 1978).
2. Reactivos y disoluciones
Suelos básicos (pH >6): DTPA 0,05 M ajustado a pH 7,30.
- Pesar los siguientes reactivos en un vaso de precipitados de 250 mL:
- DTPA (ácido dietilen-triamin-pentaacético): 1,9667 g
- CaCl2.2H2O (0,01 N): 0,0735 g
- Trietanolamina (TEA) (0,1 M): 14 mL (TEA 98 %) ó 15,6 mL (TEA 85 %).
- Pesar los siguientes reactivos en un vaso de precipitados de 250 mL:
- EDTA (ácido etilen-diaminetetraacético): 1,8612 g.
- Acetato de amonio AcNH4: 77 g.
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Agitar en agitador magnético hasta conseguir una mezcla homogénea.
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Enrasar a 1 L con agua desionizada.
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Traspasar a un vaso de precipitados de 1 L.
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Colocar el vaso de precipitados sobre el agitador magnético y acoplar el electrodo de pH.
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Para suelos básicos: Medir el pH inicial de la solución y ajustarlo a 7,3 adicionando gradualmente HCl (37%) en modo continuo hasta llegar a pH de 7,3.
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Para suelos ácidos: Medir el pH inicial de la solución y ajustarlo a 4,65 adicionando gradualmente HCl (37%) en modo continuo hasta llegar a pH de 4,65.
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Almacenar en botella ámbar debidamente rotulada, en lugar fresco y oscuro.
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Vasos de precipitados de 250 y 1000 mL
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Tubos falcon de 50 mL
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Embudos de vidrio de 5 cm
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Viales de plástico de 50 mL
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Papel de filtros cuantitativo de 110 mm de diámetro (7-11 mm de diámetro de poro)
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Balanza de precisión
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Centrífuga
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Placa agitadora
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Agitador magnético
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Equipo de espectroscopía de absorción atómica.
Residuos Básicos (pH > 6)
Se emplea como extractante el agente quelatante DTPA.
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Pesar 15 g de residuo tamizado < 2 mm. Se recomienda pesar directamente en el tubo falcon, en la balanza de precisión, anotando el peso exacto.
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Adicionar DTPA en relación 1:2 (30 mL).
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Agitar durante 2 h en la placa agitadora.
Se emplea como agente quelatante EDTA 0,005 M.
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Pesar 8 g de residuo tamizado < 2 mm. Se recomienda pesar directamente en el tubo falcon en la balanza de precisión, anotando el peso exacto.
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Adicionar EDTA en relación 1:5 (40 mL).
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Agitar durante 1 h en la placa agitadora.
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Centrifugar las muestras aproximadamente a 2100 rpm durante 5 min, o más si no se observa remoción de la turbiedad.
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Filtrar en viales de 50 mL (en caso de obtener turbiedad pasar por un filtro de 0,45 µm).
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Medir por espectrofotometría de absorción atómica.
M = mg metal L-1.7. Observaciones
fd = factor de dilución (volumen final/alícuota).
V = volumen añadido de EDTA o DTPA (mL).
P = peso de la muestra de suelo seco (g).
No existe ninguna observación destacable.
8. Interpretación de resultados
Para una adecuada interpretación de resultados no solo se debe de tener en cuenta la concentración de metal biodisponible, sino que se debe de calcular el porcentaje de metal que se encuentra biodisponible respecto a su contenido total. Posteriormente, ambos valores deben de compararse con zonas naturales que sirvan de referencia.